包头市金丰气体有限责任公司
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在包头工业气体中液氮的保存法又称超低温保存法,主要利用微生物在低于-130℃的低温下停止新陈代谢的原理,在液氮(-196℃的超低温下)有效保存菌种。该方法操作简单,保存期一般可达15年以上,是目前公认的菌种长期保存技术之一。适用于各种微生物菌种的保存。接下来,让小编简单介绍一下液氮保存法的具体内容。
一般而言,采用液氮保存时需购买超低温液氮设备,且液氮消耗量大,成本高;其低温保存的保护剂一般选用糊精.甘油.二钾基亚砜.血清蛋白.聚乙烯氮戊环及吐温80等;常用的是甘油(10%~20%)不同的微生物应选择不同的保护剂,浓度应控制在不致微生物死亡的情况下。
1.操作方法:将微生物细胞悬挂在含有保护剂(20%甘油、10%DMSO等)的液体培养基中(也可将含有菌琼脂块直接浸入含有保护剂的培养液中)。),然后放入耐低温的安瓿中缓慢预冷,然后移至液氮罐中的液相(-196℃)或气相(-156℃)进行长期超低温保存。
2.操作原则:慢冻快溶。
3.原理:利用微生物在-130℃以下的新陈代谢,有效保存微生物。0.5mol/L左右的甘油或二钾亚砜可以通过减少强脱水来渗透细胞和保护细胞。
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